ไดไฮโดรเอทิเดียม

Dihydroethidium (DHE) เป็นโพรบตรวจจับฟลูออเรสเซนต์ที่ใช้กันทั่วไปสำหรับแอนไอออนของซูเปอร์ออกไซด์ DHE เข้าสู่เซลล์อย่างอิสระและดีไฮโดรจีเนตเมื่อมีไอออนซูเปอร์ออกไซด์ภายในเซลล์เพื่อผลิตเอทิเดียมโบรไมด์ เอทิเดียมโบรไมด์จับกับกรดนิวคลีอิกในเซลล์และก่อให้เกิดแสงเรืองแสงสีแดง เมื่อระดับไอออนของซูเปอร์ออกไซด์ภายในเซลล์สูง ก็จะยิ่งสร้างเอทิเดียมโบรไมด์มากขึ้น ความเข้มของฟลูออเรสเซนซ์ก็จะยิ่งสูงขึ้น และในทางกลับกัน ความเข้มของฟลูออเรสเซนซ์ก็จะยิ่งอ่อนลง ดังนั้นจึงสามารถใช้เพื่อตรวจจับระดับไอออนซูเปอร์ออกไซด์ภายในเซลล์ได้

จัดส่งด้วยน้ำแข็งแห้ง เก็บที่อุณหภูมิ -20 ให้ห่างจากแสงเป็นเวลา 6 เดือน

หมายเหตุ: จำนวนปฏิกิริยาข้างต้นได้รับการประเมินสำหรับ 6-ระบบเพลตหลุม

1. ผลิตภัณฑ์นี้คือมาสเตอร์แบทช์ไดไฮโดรเอทิเดียม (โพรบฟลูออเรสเซนต์ไอออนซูเปอร์ออกไซด์) ขนาด 5 มิลลิโมลาร์ ซึ่งเจือจางลงในสารละลายทำงานของ DHE (โดยปกติ 1-10 μM ก็เพียงพอสำหรับการทดลอง) โดยใช้ตัวกลางหรือบัฟเฟอร์ที่เหมาะสม

2. ล้างเซลล์ปกติหรือเซลล์ที่ได้รับการบำบัด 1-2 ครั้งด้วย PBS หรือบัฟเฟอร์อื่นๆ

3. หลังจากถอดบัฟเฟอร์สำหรับล้างออก ให้เติมสารละลายทำงาน DHE 1 มล. และบ่มเป็นเวลา 30 นาทีในตู้เพาะเลี้ยงเซลล์ที่ป้องกันจากแสง

4. ลบสารละลายการทำงาน DHE ออกและล้าง 1-2 ครั้งด้วย PBS หรือบัฟเฟอร์อื่นๆ

5. ทดสอบภายใต้เครื่องมือที่เกี่ยวข้อง DHE นั้นเป็นฟลูออเรสเซนต์สีน้ำเงิน Ex คือ 355 นาโนเมตร Em คือ 420 นาโนเมตร เมื่อ DHE ดีไฮโดรจีเนตและจับกับกรดนิวคลีอิก จะแสดงให้เห็นแสงเรืองแสงสีแดง Ex คือ 520 นาโนเมตร Em คือ 605 นาโนเมตร

1. เนื่องจากประเภทและคุณสมบัติที่แตกต่างกันของเซลล์ ความเข้มข้นในการทำงานของโพรบและเวลาฟักตัวจึงสามารถปรับได้อย่างเหมาะสมตามความต้องการของการทดลอง

2. วิธีการแก้ปัญหาการทำงานของโพรบ บัฟเฟอร์การซัก ฯลฯ จะต้องได้รับการอุ่นล่วงหน้าและดำเนินการล่วงหน้าเพื่อหลีกเลี่ยงการกระตุ้นความแตกต่างของอุณหภูมิที่ส่งผลต่อเซลล์

3. สีย้อมเรืองแสงอาจมีการดับ และกระบวนการควรได้รับการปกป้องจากแสง

4. ไดไฮโดรเอทิเดียมถูกออกซิไดซ์ได้ง่ายในอากาศ หลีกเลี่ยงการสัมผัสกับอากาศให้มากที่สุด แนะนำให้เก็บในส่วนเล็กๆ และหลีกเลี่ยงการแช่แข็งและละลายซ้ำๆ

5. เพื่อสุขภาพและความปลอดภัยของคุณ โปรดสวมเสื้อกาวน์และถุงมือระหว่างการปฏิบัติงาน

สำหรับใช้ในการวิจัยเท่านั้น!

ป้ายกำกับยอดนิยม: ไดไฮโดรเอทิเดียม ผู้ผลิตไดไฮโดรเอทิเดียมจีน ซัพพลายเออร์ โรงงาน