ข้อมูลผลิตภัณฑ์
|
ชื่อสินค้า |
แมว. เลขที่. |
ข้อมูลจำเพาะ |
|
ชุดทดสอบความมีชีวิตของเซลล์เรืองแสง ATP |
G1612-100T |
10 มล |
|
G1612-1000T |
100 มล |
รายละเอียดสินค้า/บทนำ
ATP เป็นโมเลกุลพลังงานที่สำคัญในเซลล์ซึ่งมีบทบาทสำคัญในกิจกรรมทางสรีรวิทยาและชีวเคมีต่างๆ ของเซลล์ และเป็นที่รู้จักในชื่อสกุลเงินของพลังงานในสิ่งมีชีวิต สถานะเซลล์และจำนวนเซลล์แสดงความสัมพันธ์กับ ATP ดังนั้นจำนวนเซลล์หรือความมีชีวิตสามารถประเมินได้โดยระดับสัมพัทธ์ของ ATP
ชุดนี้ใช้หลักการของลูซิเฟอเรสที่ขึ้นกับ ATP โดยเร่งปฏิกิริยาลูซิเฟอร์รินเพื่อสร้างสารเรืองแสง ซึ่งสามารถตรวจจับและประเมินระดับ ATP ในเซลล์ได้อย่างมีประสิทธิภาพ เมื่อเปรียบเทียบกับวิธีการดั้งเดิม เช่น CCK-8 และ MTT วิธีการเรืองแสงมีข้อดีคือมีความไวสูงและช่วงกว้าง
เงื่อนไขการจัดเก็บและการจัดส่ง
จัดส่งด้วยน้ำแข็งแห้ง เก็บที่อุณหภูมิ -80 องศาให้ห่างจากแสงเป็นเวลา 12 เดือน เก็บที่อุณหภูมิ -20 องศาให้ห่างจากแสง แนะนำให้ใช้ภายใน 6 เดือน
เนื้อหาผลิตภัณฑ์
|
ส่วนประกอบ |
G1612-100T |
G1612-1000T |
|
ชุดทดสอบความมีชีวิตของเซลล์เรืองแสง ATP |
10 มล |
100 มล |
|
คู่มือ |
1 ชิ้น |
|
ระเบียบวิธี/ขั้นตอนการทดสอบ
1. งานประมวลผลล่วงหน้าของเซลล์:ปลูกฝังเซลล์ที่ความหนาแน่นที่กำหนดในแผ่นหลุม 96- (โปรดเลือกแผ่นหลุมสีขาวทึบแสงที่เหมาะสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ หรือใช้แผ่นเพาะเลี้ยงเซลล์ปกติ เมื่อดำเนินการตรวจจับ ให้ถ่ายโอนสารละลายไปยังหลุมตรวจจับสีขาว ลดการรบกวนระหว่างหลุมที่อยู่ติดกัน) และเตรียมเซลล์ล่วงหน้าตามวัตถุประสงค์ของการทดลอง
2. การเตรียมตัวอย่างสำหรับมาตรฐาน ATP (ไม่บังคับ):มาตรฐาน ATP (ประกอบด้วยในตัว) ค่อยๆ เจือจางด้วยบัฟเฟอร์ เช่น PBS หรือตัวกลางที่เป็นฐาน และเติมลงในเพลตหลุมที่ 100 ไมโครลิตร/หลุม
3. การทดสอบความมีชีวิตของเซลล์:
3.1. นำรีเอเจนต์ ATP Luminescence Cell Viability Assay Reagent ออกมาล่วงหน้า ละลายและนำกลับไปที่อุณหภูมิห้อง
3.2. นำแผ่นเพาะเลี้ยงเซลล์ออกและปรับสมดุลที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 5-10 นาที
3.3. รีเอเจนต์การทดสอบความมีชีวิตของเซลล์เรืองแสงของ ATP ถูกเติมโดยตรงไปยังเพลตของหลุมที่ 100 ไมโครลิตร/หลุม;
3.4. เขย่าในแนวนอนเป็นเวลา 1-2 นาที หรือแตะเพื่อผสม
3.5. หลังจากยืนเป็นเวลา 3 นาที การทดสอบเคมีเรืองแสงสามารถทำได้โดยใช้ลูมิโนมิเตอร์ ซึ่งเป็นเครื่องติดฉลากเอนไซม์มัลติฟังก์ชั่นพร้อมโมดูลตรวจจับเคมีเรืองแสง หรือเครื่องมืออื่นๆ ที่สามารถตรวจจับการเรืองแสงจากสิ่งมีชีวิตได้ (หมายเหตุ: ตัวตัวอย่างเองจะไม่ปล่อยแสงในวิธีการเรืองแสง แต่จำเป็นต้องใช้ ตื่นเต้นกับความยาวคลื่นเฉพาะของแสงกระตุ้นแล้วรับผ่านช่องพิเศษ ในเคมีเรืองแสง ตัวตัวอย่างจะปล่อยแสงออกมาเองและไม่ ต้องตื่นเต้นกับความยาวคลื่นเฉพาะของแสงกระตุ้นเพื่อให้อุปกรณ์ที่เกี่ยวข้องตรวจจับได้)
4. การวิเคราะห์ข้อมูล:การวิเคราะห์ข้อมูลต่อไปนี้จะขึ้นอยู่กับการลบพื้นหลังว่าง
4.1. การวิเคราะห์จำนวนเซลล์สัมพัทธ์ (การเพิ่มจำนวน): กำหนดจำนวนเซลล์ตามค่าความเข้มของฟลูออเรสเซนซ์
4.2. การคำนวณความมีชีวิตของเซลล์ (ความอยู่รอดของการเพิ่มจำนวนเซลล์หรือความเป็นพิษต่อเซลล์):

บันทึก:
A (กลุ่มการให้ยา): เซลล์ที่ได้รับการบำบัด + การทดสอบความมีชีวิตของเซลล์เรืองแสง ATP
A1 (ไม่มีกลุ่มยา): เซลล์ปกติที่ไม่ผ่านการบำบัด + รีเอเจนต์การทดสอบความมีชีวิตของเซลล์เรืองแสง ATP
A0 (กลุ่มควบคุมว่าง): ตัวกลางเพาะเลี้ยงเซลล์ (ไม่มีเซลล์) + รีเอเจนต์การทดสอบความมีชีวิตของเซลล์เรืองแสง ATP
4.3. การวิเคราะห์เชิงปริมาณของเนื้อหา ATP (ทางเลือก):
4.3.1. ค่าความเข้มของฟลูออเรสเซนซ์ของเส้นโค้งมาตรฐาน ATP ที่ตรวจพบจะถูกลบออกจากข้อมูลค่าความเข้มของฟลูออเรสเซนซ์ของกลุ่มควบคุมเปล่า และกราฟมาตรฐานถูกพล็อตโดยใช้ซอฟต์แวร์ เช่น Excel และได้รับสูตร:

โดยที่ a แทนความชัน และ b แทนจุดตัด
4.3.2. ค่า X (เนื้อหา ATP) ในระบบการทดสอบคำนวณตามสูตร:

คำนวณค่า Y โดยการแทนที่ความชัน a และจุดตัด b จาก 4.3.1 ลงในสมการข้างต้น
4.3.3. การคำนวณเนื้อหา ATP ในกลุ่มตัวอย่าง:

บันทึก
1. เพื่อให้แน่ใจว่ามีการใช้รีเอเจนต์ทดสอบอย่างมีประสิทธิภาพ แนะนำให้จัดเก็บในปริมาณน้อยและหลีกเลี่ยงการแช่แข็งและละลายซ้ำๆ
2. ความบิดเบี้ยวของเวลาการทดสอบจะถูกควบคุมภายใน 5-30 นาที เพื่อให้มั่นใจในความถูกต้องของข้อมูลการทดสอบ
3. ส่วนหนึ่งของการตกตะกอนของรีเอเจนต์หลังจากการละลายเป็นปรากฏการณ์ปกติ ก่อนที่จะใช้งานให้เขย่าจนเต็มเพื่อให้แน่ใจว่าจะละลายได้อย่างสมบูรณ์
4. พยายามหลีกเลี่ยงแสงและเติมน้ำยาทดสอบภายในระยะเวลาอันสั้น ขอแนะนำให้ใช้ปิเปตแบบหลายหลุมเพื่อเพิ่มตัวอย่าง และใส่ใจกับความสม่ำเสมอของปริมาตรการปิเปตในแต่ละหลุมของปิเปต
5. เพื่อสุขภาพและความปลอดภัยของคุณ โปรดสวมเสื้อกาวน์และถุงมือระหว่างการปฏิบัติงาน
สำหรับใช้ในการวิจัยเท่านั้น!
ป้ายกำกับยอดนิยม: ชุดทดสอบความมีชีวิตของเซลล์เรืองแสง atp ประเทศจีน ผู้ผลิตชุดทดสอบความมีชีวิตของเซลล์เรืองแสง atp ซัพพลายเออร์ โรงงาน
