คราบ AB-PAS

ผลิตภัณฑ์ AB-PAS Stain เป็นส่วนผสมของ Alcian Blue (AB) และสารละลายสีย้อม PAS Alcian หรือที่รู้จักกันในชื่อ alcian blue เป็นสีย้อมคอปเปอร์เปปไทด์ไซยานีนชนิดหนึ่งซึ่งมีความเป็นด่างและเป็นของสีย้อมประจุบวก สีย้อมสามารถรวมกับกลุ่มกรดเพื่อสร้างสีเนื้อเยื่อด้วยกลุ่มประจุลบ (เช่น กลุ่มคาร์บอกซิล) อัลเซียนบลูเป็นสีย้อมเฉพาะเพื่อแสดงสารเมือกที่เป็นกรด ซึ่งทำให้เมือกโพลีแซ็กคาไรด์ที่เป็นกรดในไซโตพลาสซึมปรากฏเป็นสีน้ำเงิน ในขณะที่เมือกที่เป็นกลางจะไม่เกิดคราบ สารละลายสีย้อม PAS ใช้สำหรับการย้อมไกลโคเจน PAS หรือที่เรียกว่า periodate Schiff Stain ซึ่งส่วนใหญ่ใช้ในการตรวจหาสารไกลโคเจนและโพลีแซ็กคาไรด์ในเนื้อเยื่อทางจุลสัณฐานวิทยา หลักการสำคัญคือการออกซิไดซ์หมู่ไฮดรอกซิลบนอะตอมคาร์บอน 2 อะตอมที่อยู่ติดกันในวัสดุคาร์โบไฮเดรตไปยังหมู่อัลดีไฮด์ผ่านกรดคาบของสารออกซิแดนท์ จากนั้นทำปฏิกิริยากับหมู่อัลดีไฮด์ด้วยรีเอเจนต์ชิฟฟ์เพื่อผลิตสารสีม่วงแดง กรดไกลโคโปรตีนและไกลโคโปรตีนที่เป็นกลางสามารถแยกแยะได้โดยการรวมกันของ Alcian blue และสีย้อม PAS

ผลิตภัณฑ์นี้เป็นชุดรวมกัน สารละลายการย้อมสี AB-PAS A คือรีเอเจนต์ของ Schiff, สารละลายการย้อมสี AB-PAS B คือสารละลายที่มีระยะเวลา 0.5% และสารละลายการย้อมสี AB-PAS C คือสีน้ำเงินอัลเซียน โดยมีความเข้มข้น 1% และค่า pH เป็น ประมาณ 2.5 หลังจากย้อมตัวอย่างด้วยผลิตภัณฑ์นี้แล้ว สารเมือกที่เป็นกรดจะเป็นสีน้ำเงิน สารไกลโคเจนและเมือกที่เป็นกลางจะเป็นสีแดง และสารเมือกผสมจะเป็นสีม่วงสีน้ำเงินหรือสีน้ำเงินม่วง โดยทั่วไปแล้ว ในเมือกของระบบทางเดินอาหารปกติ เยื่อบุผิวของเยื่อบุกระเพาะอาหาร ต่อม pyloric ต่อมลำไส้เล็กส่วนต้น ฯลฯ ส่วนใหญ่เป็นสารเมือกที่เป็นกลางสีแดง เซลล์กุณโฑและต่อมลำไส้ของลำไส้เล็กและลำไส้ใหญ่ส่วนใหญ่หลั่งเมือกที่เป็นกรด

การขนส่งน้ำแข็งเปียก รีเอเจนต์ทั้งชุดจะต้องเก็บไว้ที่ 2-8 องศา และระยะเวลาที่ใช้ได้คือ 12 เดือน ในบรรดาสารละลายเหล่านี้ สารละลายการย้อมสี AB-PAS B และสารละลายการย้อมสี AB-PAS C ยังสามารถเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องได้

การเตรียมตัวก่อนการทดลอง

เตรียมไซลีน, เอทานอลแบบไล่ระดับ, เอทานอลสัมบูรณ์, กัมที่เป็นกลาง ฯลฯ

วิธีการใช้งาน

1. การแว็กซ์พาราฟินชิ้นลงในน้ำ: ชิ้นงานจะถูกล้างแว็กซ์ด้วยไซลีนเป็นเวลา 10 นาทีตามลำดับ, ล้างแว็กซ์ด้วยไซลีนสดเป็นเวลา 10 นาที, เอทานอลสัมบูรณ์เป็นเวลา 5 นาที, เอทานอลสัมบูรณ์สดเป็นเวลา 5 นาที, เอทานอล 90% เป็นเวลา 5 นาที, 75 % เอทานอลเป็นเวลา 5 นาที แล้วล้างด้วยน้ำประปา

2. หั่นเป็นสารละลายการย้อมสี AB-PAS C เป็นเวลา 8-10 นาที และล้างสไลด์ด้วยน้ำประปาจนกระทั่งน้ำไหลไม่มีสี

3. ชิ้นแช่ในสารละลายการย้อมสี AB-PAS B เป็นเวลา 10-15 นาที จากนั้นแช่ในน้ำบริสุทธิ์ 3 ครั้ง ชิ้นละประมาณ 10 วินาที

4. นำชิ้นที่ได้ใส่ลงในสารละลายย้อมสี AB-PAS A (เก็บที่อุณหภูมิห้องไว้ล่วงหน้า) คลุมไว้และจุ่มในที่มืดเป็นเวลา 25-30 นาที และล้างด้วยน้ำไหลเป็นเวลา 5 นาที

5. หั่นเอทานอลปราศจากน้ำออกเป็นสามกระบอกเพื่อการคายน้ำ ครั้งละ 5 นาที หลังจากที่ไซลีนโปร่งใสเป็นเวลา 5 นาที ให้แทนที่ด้วยไซลีนใหม่อีก 5 นาที จากนั้นจึงติดด้วยยางที่เป็นกลาง

1. น้ำยาย้อมสี AB-PAS B สามารถใช้ซ้ำได้ น้ำยาย้อมสีมีความโปร่งใส หากปรากฏเป็นสีเหลืองอย่างเห็นได้ชัด มีสิ่งเจือปน และเนื้อเยื่อเปื้อนสีจางเกินไป จะต้องเปลี่ยนน้ำยาย้อมสีใหม่

2. น้ำยาย้อมสี AB-PAS A ต้องเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4 องศา นำออกมาพักที่อุณหภูมิห้องก่อนใช้งาน เมื่อสีของสารละลายเป็นสีแดงอย่างเห็นได้ชัด แนะนำให้เปลี่ยนด้วยน้ำยาย้อมสีใหม่

3. น้ำยาย้อมสีแต่ละชุด (ขนาด 20 มล.) สามารถใช้ย้อมได้ประมาณ 80 ส่วน เปลี่ยนน้ำยาย้อมสีใหม่เมื่อเนื้อเยื่อหรือสีของเซลล์จางลงอย่างมากหรือผิดปกติ

4. กรุณาสวมเสื้อผ้าห้องปฏิบัติการและถุงมือแบบใช้แล้วทิ้งระหว่างการทำงาน

สำหรับใช้ในการวิจัยเท่านั้น!

ป้ายกำกับยอดนิยม: คราบ ab-pas ผู้ผลิตคราบ ab-pas ซัพพลายเออร์ โรงงาน