ชุดการสังเคราะห์ CDNA ของ MiRNA First Strand (ปฏิกิริยาหาง)

ชุดการสังเคราะห์ CDNA ของ MiRNA First Strand (ปฏิกิริยาหาง)
การแนะนำสินค้า:
หมายเลขแมว:G3334-25
ยี่ห้อ:Servicebio
Spec.:25 rxns
ส่งคำถาม
คำอธิบาย
พารามิเตอร์ทางเทคนิค

แนะนำผลิตภัณฑ์

 

ชื่อสินค้า

แมว. เลขที่

ข้อมูลจำเพาะ

ชุดการสังเคราะห์ cDNA ของ miRNA First Strand (ปฏิกิริยาหาง)

G3334-25

25 rxn

 

รายละเอียดสินค้า/บทนำ

 

ชุดการสังเคราะห์ cDNA สายแรกของ miRNA (ปฏิกิริยาหาง) มีรีเอเจนต์ทั้งหมดที่จำเป็นสำหรับการสังเคราะห์ cDNA สายแรกของ miRNA ชุดอุปกรณ์นี้ใช้ RNA ทั้งหมดหรือ miRNA เป็นเทมเพลต และปฏิกิริยาหางโพลี (A) โพลีเมอเรสและปฏิกิริยาการถอดรหัสแบบย้อนกลับจะถูกซิงโครไนซ์เพื่อสังเคราะห์ cDNA สายแรกของ miRNA ต่างๆ ที่มีประสิทธิภาพสูง ชุดนี้ยังประกอบด้วย U6 Forward Primer และ Universal Reverse Primer สำหรับการขยายในภายหลัง (ใช้ได้กับตัวอย่างของมนุษย์ หนู และหนู) และผลิตภัณฑ์ cDNA สายเดี่ยวสังเคราะห์จะต้องได้รับการออกแบบด้วยไพรเมอร์ PCR แบบส่งต่อสำหรับ PCR หรือ qPCR ตามมาเท่านั้น

 

เงื่อนไขการจัดเก็บและการจัดส่ง

 

จัดส่งด้วยน้ำแข็งเปียก เก็บที่อุณหภูมิ -20 องศา มีอายุ 12 เดือน

 

เนื้อหาผลิตภัณฑ์

 

หมายเลขส่วนประกอบ

ส่วนประกอบ

G3334-25

G3334-1

miRNA RT เอนไซม์ มิกซ์ซ่า

25 μL

G3334-2

5×บัฟเฟอร์ปฏิกิริยา

100 μL

G3334-3

U6 ฟอร์เวิร์ด PCR ไพรเมอร์ (10 μM)

100 μL

G3334-4

สีรองพื้น Universal Reverse PCR (10 μM)

100 μL

G3334-5

น้ำปลอดนิวเคลียร์

1 มล

คู่มือ

หนึ่งสำเนา

a:ด้วยสารยับยั้ง RNase และโพลี(A) โพลีเมอเรส

b:ด้วยไพรเมอร์การถอดรหัสแบบย้อนกลับ, ส่วนผสม dNTP, ATP และMg²+

 

ระเบียบวิธี/ขั้นตอนการทดสอบ

 

1. การเตรียมระบบปฏิกิริยาที่แนะนำ (แนะนำการเตรียมระบบปฏิกิริยาบนน้ำแข็ง)

ส่วนประกอบ

ปริมาณ

5×บัฟเฟอร์ปฏิกิริยา

4 μL

miRNA RT เอนไซม์มิกซ์

1 μL

RNA ทั้งหมด/miRNAa

x μL

น้ำปลอดนิวเคลียร์

เพิ่มเป็น 20 ไมโครลิตร

a: RNA รวมที่แนะนำคือ 2 ug (ไม่เกิน 5 ug) และ miRNA ที่แนะนำคือ 200 ng

2. ค่อยๆ ผสมและปั่นแยก

3. ดำเนินการโพลีเมอร์ไรซ์ (A) และการถอดรหัสแบบย้อนกลับโดยใช้สภาวะความร้อนที่แนะนำด้านล่าง:

อุณหภูมิ

เวลา

37 องศา

60 นาที

85 องศา

5 วินาที

4. แนะนำให้ใช้สารละลายปฏิกิริยา cDNA ที่ได้รับสำหรับการเจือจางแบบไล่ระดับก่อนที่จะใช้เป็นเทมเพลตสำหรับ PCR เชิงปริมาณเรืองแสงในภายหลัง

 

บันทึก

 

1. ระมัดระวังเพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อน RNase ระหว่างการผ่าตัด

2. ผลิตภัณฑ์การถอดรหัสแบบย้อนกลับสามารถเก็บไว้ที่ระดับ -20 ในช่วงเวลาสั้นๆ หากจำเป็นต้องจัดเก็บในระยะยาว แนะนำให้เก็บที่อุณหภูมิ -80 องศาหลังการบรรจุ และหลีกเลี่ยงการแช่แข็งและละลายซ้ำๆ

3. ชุดประกอบด้วยไพรเมอร์ดาวน์สตรีมอเนกประสงค์สำหรับ PCR เชิงปริมาณ และไพรเมอร์อัปสตรีมเป็นไพรเมอร์เฉพาะของ miRNA ซึ่งออกแบบตาม miRNA เป้าหมาย และโดยทั่วไปแล้วไพรเมอร์อัปสตรีมคือลำดับ miRNA เป้าหมายที่เปลี่ยน U เป็น T

 

สำหรับใช้ในการวิจัยเท่านั้น!

 

 

ป้ายกำกับยอดนิยม: ชุดการสังเคราะห์ cdna ของ Mirna เส้นแรก (ปฏิกิริยาหาง) ประเทศจีน ผู้ผลิตชุดการสังเคราะห์ cdna ของ Mirna เส้นแรก (ปฏิกิริยาหาง) ซัพพลายเออร์ โรงงาน

ส่งคำถาม