แนะนำผลิตภัณฑ์
|
ชื่อสินค้า |
แมว. เลขที่ |
ข้อมูลจำเพาะ |
|
ชุดการสังเคราะห์ cDNA ของ miRNA First Strand (ปฏิกิริยาหาง) |
G3334-25 |
25 rxn |
รายละเอียดสินค้า/บทนำ
ชุดการสังเคราะห์ cDNA สายแรกของ miRNA (ปฏิกิริยาหาง) มีรีเอเจนต์ทั้งหมดที่จำเป็นสำหรับการสังเคราะห์ cDNA สายแรกของ miRNA ชุดอุปกรณ์นี้ใช้ RNA ทั้งหมดหรือ miRNA เป็นเทมเพลต และปฏิกิริยาหางโพลี (A) โพลีเมอเรสและปฏิกิริยาการถอดรหัสแบบย้อนกลับจะถูกซิงโครไนซ์เพื่อสังเคราะห์ cDNA สายแรกของ miRNA ต่างๆ ที่มีประสิทธิภาพสูง ชุดนี้ยังประกอบด้วย U6 Forward Primer และ Universal Reverse Primer สำหรับการขยายในภายหลัง (ใช้ได้กับตัวอย่างของมนุษย์ หนู และหนู) และผลิตภัณฑ์ cDNA สายเดี่ยวสังเคราะห์จะต้องได้รับการออกแบบด้วยไพรเมอร์ PCR แบบส่งต่อสำหรับ PCR หรือ qPCR ตามมาเท่านั้น
เงื่อนไขการจัดเก็บและการจัดส่ง
จัดส่งด้วยน้ำแข็งเปียก เก็บที่อุณหภูมิ -20 องศา มีอายุ 12 เดือน
เนื้อหาผลิตภัณฑ์
|
หมายเลขส่วนประกอบ |
ส่วนประกอบ |
G3334-25 |
|
G3334-1 |
miRNA RT เอนไซม์ มิกซ์ซ่า |
25 μL |
|
G3334-2 |
5×บัฟเฟอร์ปฏิกิริยา |
100 μL |
|
G3334-3 |
U6 ฟอร์เวิร์ด PCR ไพรเมอร์ (10 μM) |
100 μL |
|
G3334-4 |
สีรองพื้น Universal Reverse PCR (10 μM) |
100 μL |
|
G3334-5 |
น้ำปลอดนิวเคลียร์ |
1 มล |
|
คู่มือ |
หนึ่งสำเนา |
|
a:ด้วยสารยับยั้ง RNase และโพลี(A) โพลีเมอเรส
b:ด้วยไพรเมอร์การถอดรหัสแบบย้อนกลับ, ส่วนผสม dNTP, ATP และMg²+
ระเบียบวิธี/ขั้นตอนการทดสอบ
1. การเตรียมระบบปฏิกิริยาที่แนะนำ (แนะนำการเตรียมระบบปฏิกิริยาบนน้ำแข็ง)
|
ส่วนประกอบ |
ปริมาณ |
|
5×บัฟเฟอร์ปฏิกิริยา |
4 μL |
|
miRNA RT เอนไซม์มิกซ์ |
1 μL |
|
RNA ทั้งหมด/miRNAa |
x μL |
|
น้ำปลอดนิวเคลียร์ |
เพิ่มเป็น 20 ไมโครลิตร |
a: RNA รวมที่แนะนำคือ 2 ug (ไม่เกิน 5 ug) และ miRNA ที่แนะนำคือ 200 ng
2. ค่อยๆ ผสมและปั่นแยก
3. ดำเนินการโพลีเมอร์ไรซ์ (A) และการถอดรหัสแบบย้อนกลับโดยใช้สภาวะความร้อนที่แนะนำด้านล่าง:
|
อุณหภูมิ |
เวลา |
|
37 องศา |
60 นาที |
|
85 องศา |
5 วินาที |
4. แนะนำให้ใช้สารละลายปฏิกิริยา cDNA ที่ได้รับสำหรับการเจือจางแบบไล่ระดับก่อนที่จะใช้เป็นเทมเพลตสำหรับ PCR เชิงปริมาณเรืองแสงในภายหลัง
บันทึก
1. ระมัดระวังเพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อน RNase ระหว่างการผ่าตัด
2. ผลิตภัณฑ์การถอดรหัสแบบย้อนกลับสามารถเก็บไว้ที่ระดับ -20 ในช่วงเวลาสั้นๆ หากจำเป็นต้องจัดเก็บในระยะยาว แนะนำให้เก็บที่อุณหภูมิ -80 องศาหลังการบรรจุ และหลีกเลี่ยงการแช่แข็งและละลายซ้ำๆ
3. ชุดประกอบด้วยไพรเมอร์ดาวน์สตรีมอเนกประสงค์สำหรับ PCR เชิงปริมาณ และไพรเมอร์อัปสตรีมเป็นไพรเมอร์เฉพาะของ miRNA ซึ่งออกแบบตาม miRNA เป้าหมาย และโดยทั่วไปแล้วไพรเมอร์อัปสตรีมคือลำดับ miRNA เป้าหมายที่เปลี่ยน U เป็น T
สำหรับใช้ในการวิจัยเท่านั้น!
ป้ายกำกับยอดนิยม: ชุดการสังเคราะห์ cdna ของ Mirna เส้นแรก (ปฏิกิริยาหาง) ประเทศจีน ผู้ผลิตชุดการสังเคราะห์ cdna ของ Mirna เส้นแรก (ปฏิกิริยาหาง) ซัพพลายเออร์ โรงงาน
