ตัวกลางแยกลิมโฟไซต์ (มนุษย์)

ผลิตภัณฑ์นี้เป็นโซลูชันการแยกความหนาแน่นแบบไล่ระดับซึ่งเหมาะสำหรับการแยกลิมโฟไซต์ในเลือดของมนุษย์และเซลล์โมโนนิวเคลียร์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมส่วนใหญ่ หลักการนี้ขึ้นอยู่กับความแตกต่างความหนาแน่นระหว่างเซลล์ต่างๆ ในเลือดที่อยู่รอบข้างเป็นหลัก (ความหนาแน่นของเซลล์เม็ดเลือดแดงและแกรนูโลไซต์อยู่ที่ประมาณ 1.090 กรัม/มิลลิลิตร เกล็ดเลือดคือ 1.030-1.035 กรัม /มล.; ลิมโฟไซต์และมอนอไซต์คือ 1.075-1.090 กรัม/มิลลิลิตร) ลิมโฟไซต์ถูกแยกออกจากเลือดส่วนปลายโดยการปั่นแยกด้วยความหนาแน่นของเกรเดียนต์ ผลิตภัณฑ์นี้เป็นสารละลายสำหรับแยกสารพร้อมใช้ระดับเอนโดทอกซินต่ำและผ่านการฆ่าเชื้อ โดยมีความหนาแน่น 1.077 ± 0.001 กรัม/มิลลิลิตร (20 องศา ) ผลิตภัณฑ์นี้ได้รับการปรับให้เหมาะสมบนพื้นฐานของ Ficoll meglumine diatrizoate แบบดั้งเดิม เพื่อรักษาความเสถียรของสารละลายสำหรับการแยกตัวเป็นเวลานานขึ้นหลังจากเติมตัวอย่างเลือด ทำให้ใช้งานง่ายและให้ความบริสุทธิ์และสภาวะของลิมโฟไซต์ที่แยกได้สูง

จัดส่งด้วยน้ำแข็งเปียก เก็บที่อุณหภูมิ 2-8 องศา ป้องกันจากแสง มีอายุ 12 เดือน

สำหรับการแยกลิมโฟไซต์ 1 มิลลิลิตรจากเลือดที่อยู่รอบข้างของมนุษย์ อัตราส่วนปริมาตรของเลือดต่อตัวกลางในการแยกลิมโฟไซต์คือ 1:1-1:2 โดยมีการปรับเปลี่ยนที่เหมาะสมภายในช่วงนี้ ควรใช้ความระมัดระวังเมื่อเลือกหลอดหมุนเหวี่ยงโดยปริมาตรรวมของตัวกลางในการแยกเลือดและลิมโฟไซต์ไม่เกินสองในสามของปริมาตรของหลอด

1. รับประทานเลือดครบส่วนที่มีสารต้านการแข็งตัวของเลือดสด 1 มิลลิลิตร (สามารถใช้เฮปาริน EDTA โซเดียมซิเตรต และสารต้านการแข็งตัวของเลือดอื่นๆ ได้) เจือจางด้วย PBS ในปริมาตรที่เท่ากัน (แนะนำ G4202) หรือบัฟเฟอร์ Hanks (แนะนำ g4203) ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียมที่จะได้รับ เลือดครบส่วนที่เจือจาง 2 มล.

2. ปิเปต สารละลายสำหรับแยกลิมโฟไซต์ในเลือดของมนุษย์ 3 มล. ต่อหลอดสำหรับการปั่นแยกที่ปราศจากเชื้อ 15 มล. (แนะนำให้ใช้ EP-1500-J)

3. เอียงหลอดหมุนเหวี่ยงที่ 45 องศา และค่อยๆ เติมเลือดที่เจือจางแล้ว 2 มล. ไปตามผนังหลอดลงในหลอดหมุนเหวี่ยง เพื่อให้เลือดวางราบบนชั้นบนของตัวกลางสำหรับการแยกลิมโฟไซต์ในเลือดส่วนปลายของมนุษย์

4. ขอแนะนำให้ใช้เครื่องหมุนเหวี่ยงแบบหัวแนวนอน วางท่อไว้ในอะแดปเตอร์หัวแนวนอน ลดความเร็วของเครื่องหมุนเหวี่ยง (ความเร็ว 3-5 เหมาะสม) และปั่นแยกที่ 800 xg เป็นเวลา 25 นาทีที่อุณหภูมิห้อง

5. หลังจากการปั่นแยก ท่อจะถูกจับเบา ๆ บนชั้นวางหลอด และสังเกตการแบ่งชั้นที่ชัดเจน: ชั้นบนสุดคือชั้นพลาสมา ชั้นกลางด้านบนคือชั้นลิมโฟไซต์ ชั้นกลางตอนล่างเป็นชั้นกลางของการแยกลิมโฟไซต์ และชั้นล่างสุดคือชั้นเม็ดเลือดแดงและแกรนูโลไซต์ (ดูรูปที่แนบมา)

6. นำชั้นพลาสมาชั้นบนสุดออก และค่อยๆ ดูดชั้นทูนิกา อัลบูจิเนีย (ชั้นลิมโฟไซต์) เข้าไปในหลอดสำหรับหมุนเหวี่ยงที่ปราศจากเชื้อหลอดใหม่

7. ล้างด้วย PBS 8 มล. (แนะนำ G4202) หรือบัฟเฟอร์อื่นๆ ปั่นแยกที่ 100 xg เป็นเวลา 10 นาที จากนั้นทิ้งส่วนลอยเหนือตะกอนไป

8. ทำซ้ำขั้นตอนที่ 7 (ไม่บังคับ)

9. การแขวนลอยของเซลล์เม็ดเลือดขาวอีกครั้งในตัวกลางหรือบัฟเฟอร์ที่ต้องการตามวัตถุประสงค์ของการทดลอง

1. ผลิตภัณฑ์จะต้องปรับสมดุลอย่างสมบูรณ์และผสมกลับหัวที่อุณหภูมิห้องก่อนใช้งาน อุณหภูมิที่เหมาะสมสำหรับการแยกคือ 18-25 องศา

2. เพื่อรักษาการทำงานของลิมโฟไซต์ วิธีที่ดีที่สุดคือเลือกเลือดต้านการแข็งตัวของเลือดใหม่ภายใน 2 ชั่วโมงหลังการเก็บเลือด หากต้องการเพาะเลี้ยงและทดสอบลิมโฟไซต์ที่แยกออกมาเพิ่มเติม โปรดใส่ใจกับการดำเนินการปลอดเชื้อในระหว่างการเก็บและแยกเลือด

3. เจือจางหรือล้างบัฟเฟอร์ อย่าใช้บัฟเฟอร์ที่มีแคลเซียมและแมกนีเซียมไอออนเพื่อหลีกเลี่ยงการรวมตัวของเซลล์เม็ดเลือด

4. การดูดซึมส่วนประกอบภายนอกชั้น tunica albuginea ของเซลล์เม็ดเลือดขาวมากเกินไปจะทำให้เกิดแกรนูโลไซต์หรือเกล็ดเลือดบางส่วนที่ทางแยกผสมกัน

5. ความแตกต่างระหว่างตัวอย่างเลือดอาจส่งผลต่อผลการแยกตัว แรงเหวี่ยงและเวลาสามารถปรับได้อย่างเหมาะสมตามสถานการณ์จริง แรงเหวี่ยงอ้างอิงและช่วงเวลาคือ 500-1000 xg และ 20-30 นาที

6. เป็นเรื่องปกติที่เม็ดเลือดแดงจะตกลงหลังจากผสมเลือดและตัวกลางแยกลิมโฟไซต์มาระยะหนึ่งแล้ว

7. เพื่อความปลอดภัยและสุขภาพของคุณ โปรดสวมแว่นตานิรภัย ถุงมือ หรือชุดป้องกัน

เอกสารแนบ: แผนผังของแต่ละชั้นก่อนและหลังการแยก

ผลิตภัณฑ์นี้มีวัตถุประสงค์เพื่อการวิจัยทางวิทยาศาสตร์เท่านั้น ไม่ใช่เพื่อการวินิจฉัยทางคลินิก!

ป้ายกำกับยอดนิยม: สื่อแยกลิมโฟไซต์ (มนุษย์) ผู้ผลิตสื่อแยกลิมโฟไซต์ (มนุษย์) จีน ซัพพลายเออร์ โรงงาน